結(jié)締組織生長因子小干擾RNA的構(gòu)建及其干擾效果檢測

目的:構(gòu)建結(jié)締組織生長因子(CTGF)基因的小干擾RNA(siRNA),并檢測其對(duì)CTGF基因表達(dá)的干擾效果.方法:根據(jù)CTGF基因序列,設(shè)計(jì)2條合理的CTGF-siRNA,并將其克隆到siRNA載體pSliencer 2.1-U6 neo中,轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5a,挑取陽性菌落進(jìn)行酶切和測序鑒定;將構(gòu)建成功的CTGF-siRNA重組質(zhì)粒與帶FLAG標(biāo)簽的CTGF表達(dá)載體共同轉(zhuǎn)染人胚腎293T細(xì)胞,Western印跡檢測siRNA的干擾效果.結(jié)果:構(gòu)建了2個(gè)CTGF-siRNA重組質(zhì)粒,2條siRNA都有干擾作用,其中一條的干擾效果可達(dá)75%以上.結(jié)論:構(gòu)建的CTGF-siRNA可為進(jìn)一步研究CTGF的功能提供參考.

作 者： 李勤操 鄭喜邦 王曉暉 楊智洪 姜艷超 丁麗華 李杰萍 葉棋濃 LI Qin-Cao ZHENG Xi-Bang WANG Xiao-Hui YANG Zhi-Hon JIANG Yan-Chao DING Li-Hua LI Jie-pin YE Qi-Nong   作者單位： 李勤操,LI Qin-Cao(軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院,生物工程研究所,北京,100850;廣西大學(xué),動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院,廣西,南寧,530005)

鄭喜邦,ZHENG Xi-Bang(廣西大學(xué),動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院,廣西,南寧,530005)

王曉暉,楊智洪,姜艷超,丁麗華,李杰萍,葉棋濃,WANG Xiao-Hui,YANG Zhi-Hon,JIANG Yan-Chao,DING Li-Hua,LI Jie-pin,YE Qi-Nong(軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院,生物工程研究所,北京,100850) 

刊 名： 生物技術(shù)通訊  ISTIC 英文刊名： LETTERS IN BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2008 19(3)  分類號(hào)： Q78  關(guān)鍵詞： 結(jié)締組織生長因子   小干擾RNA   表達(dá)載體  

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