出血性大腸桿菌O157:H7的Tir與stx1/2B融合基因的構(gòu)建和表達(dá)

為了更好防治由出血性大腸桿菌O157:H7引起的疾病,嘗試研制基因工程疫苗,其中亞單位疫苗具有很大優(yōu)勢.方法:構(gòu)建表達(dá)tir和stxb的融合基因,將tir基因中間295個(gè)氨基酸殘基(Tir295)與stxB亞基基因72個(gè)氨基酸串聯(lián),構(gòu)建pET28a-stx2b-Tir295-stx1b重組質(zhì)拉,將其轉(zhuǎn)化于BL21(DE3),用IPTG進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá),經(jīng)SDS-PAGE電泳檢測,該融合蛋白獲得了高效表達(dá).結(jié)果:薄層掃描分析表明,目的蛋白表達(dá)量占菌體總蛋白含量的30%左右.結(jié)論:由于該融合蛋白由Tir、stx1b和stx2b三部分抗原組成,可刺激機(jī)體產(chǎn)生針對轉(zhuǎn)位緊密素受體(Tir)和志賀毒素(stx)的抗體,在EHEC O157亞單位疫苗設(shè)計(jì)或單克隆抗體抗制備中具有重要價(jià)值.

作 者： 張雪寒 何孔旺 盧維彩 俞正玉 茅愛華 劉亞棟   作者單位： 江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院,獸醫(yī)研究所,江蘇,南京,210014  刊 名： 內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)科技  英文刊名： INNER MONGOLIA AGRICULTURAL SCIENCE AND TECHNOLOGY  年，卷(期)： 2009 ""(3)  分類號： Q78  關(guān)鍵詞： EHECl O157   H7   轉(zhuǎn)位緊密素受體   志賀毒素   融合基因  

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