CRP基因原核表達載體的構(gòu)建和表達及其免疫原性檢測

采用大腸桿菌表達體系來獲得C-反應蛋白(CRP)融合蛋白.以pDNR-CRP質(zhì)粒為模板,用PCR方法擴增獲得全長的CRP基因,將其克隆入表達載體pET28a(+)中,再轉(zhuǎn)化到宿主菌BL21(DE3)中,加入IPTG誘導表達,表達產(chǎn)物做SDS-PAGE電泳分析,最后做免疫原性檢測.成功地構(gòu)建了CRP基因原核表達載體pET28a(+)-CRP,經(jīng)IPTG誘導SDS-PAGE電泳分析表明C-反應蛋白能在大腸桿菌中獲得表達,但免疫原性檢測初步結(jié)果為陰性.結(jié)果證明CRP能以融合蛋白的形式在宿主菌BL21(DE3)中得到大量表達,表達產(chǎn)物缺乏免疫原性,其機理還有待進一步試驗探討.

作 者： 余云芳 姚偉 張昌菊 魯林 何正權(quán) 樂超銀 梁宏偉 YU Yun-fang YAO Wei ZHANG Chang-ju LU Lin HE Zheng-quan YUE Chao-yin LIANG Hong-wei   作者單位： 余云芳,YU Yun-fang(三峽大學生物技術(shù)研究中心,宜昌,443002;三峽大學醫(yī)學院,宜昌,443002)

姚偉,YAO Wei(三峽大學生物技術(shù)研究中心,宜昌,443002;福建農(nóng)林大學,農(nóng)業(yè)部甘蔗生理生態(tài)與遺傳改良重點開放實驗室,福州,350002)

張昌菊,ZHANG Chang-ju(三峽大學醫(yī)學院,宜昌,443002)

魯林,何正權(quán),樂超銀,梁宏偉,LU Lin,HE Zheng-quan,YUE Chao-yin,LIANG Hong-wei(三峽大學生物技術(shù)研究中心,宜昌,443002) 

刊 名： 江西農(nóng)業(yè)大學學報  ISTIC PKU 英文刊名： ACTA AGRICULTURAE UNIVERSITATIS JIANGXIENSIS(NATURAL SCIENCES EDITION)  年，卷(期)： 2006 28(2)  分類號： Q786  關(guān)鍵詞： C反應蛋白   原核表達   IPTG   免疫原性  

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