用雙特異探針技術(shù)定性定量分析微型原甲藻

針對微型原甲藻核糖體大亞基和小亞基RNA分別設(shè)計了大亞基探針(LSU probe)和小亞基探針(SSU probe),發(fā)展了對微型原甲藻進行定性和定量分析的雙特異探針技術(shù).分析數(shù)據(jù)表明針對微型原甲藻核糖體大亞基RNA的LSU probe能夠特異地將微型原甲藻和其他7種微藻分開,而且檢測信號的強弱在一定的范圍內(nèi)與細(xì)胞數(shù)呈線性關(guān)系;由于針對微型原甲藻核糖體小亞基的SSU probe探針由于與具齒原甲藻存在核酸序列一致性,該探針與具齒原甲藻有嚴(yán)重的交叉反應(yīng),但未發(fā)現(xiàn)與海洋原甲藻和其他藻的交叉反應(yīng).另外,研究還優(yōu)化了破碎微型原甲藻細(xì)胞所需的超聲時間以及獲得探針的特異性所需的S1酶反應(yīng)溫度.本研究為實現(xiàn)對微型原甲藻海水樣品的快速準(zhǔn)確監(jiān)測奠定了基礎(chǔ).

作 者： 蔡青松 李榮秀 甄毓 米鐵柱 于志剛 CAI Qing-song LI Rong-xiu ZHEN Yu MI Tie-zhu YU Zhi-gang   作者單位： 蔡青松,CAI Qing-song(中國科學(xué)院,上海生命科學(xué)研究院,上海,200031;中國科學(xué)院,研究生院,北京,100039)

李榮秀,LI Rong-xiu(上海交通大學(xué),生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院,上海200030)

甄毓,米鐵柱,于志剛,ZHEN Yu,MI Tie-zhu,YU Zhi-gang(中國海洋大學(xué),化學(xué)化工學(xué)院,山東,青島,266003) 

刊 名： 海洋學(xué)報（中文版）  ISTIC PKU 英文刊名： ACTA OCEANOLOGICA SINICA  年，卷(期)： 2006 28(6)  分類號： P716+5 Q749.2  關(guān)鍵詞： 核糖體RNA   雙特異探針技術(shù)   微型原甲藻?  

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