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牛卵母細(xì)胞玻璃化冷凍保存影響因素的研究
采用毛細(xì)玻璃管法對牛卵母細(xì)胞進(jìn)行玻璃化冷凍保存,解凍后再進(jìn)行體外受精(IVF)和早期胚胎的體外培養(yǎng)(IVC).在此技術(shù)的基礎(chǔ)上,分別對冷凍前平衡時(shí)間、解凍處理、卵丘細(xì)胞層數(shù)以及卵母細(xì)胞所處的減數(shù)分裂階段等影響卵母細(xì)胞冷凍保存的因素進(jìn)行研究,以期篩選出適合牛卵母細(xì)胞冷凍保存的方法.結(jié)果發(fā)現(xiàn),處于MⅡ期卵母細(xì)胞在10%二甲基亞砜(DMSO) +10%乙二醇(EG)液(VS1)中平衡1~3min,然后進(jìn)行玻璃化冷凍保存.解凍時(shí)將卵母細(xì)胞先移入VS1液中處理15s,然后移入蔗糖稀釋液中.另外發(fā)現(xiàn),冷凍保存時(shí)部分卵丘細(xì)胞對卵母細(xì)胞有保護(hù)作用.而減數(shù)分裂階段不影響解凍后卵母細(xì)胞形態(tài)正常率,但對胚胎發(fā)育率有嚴(yán)重影響.
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