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細(xì)菌脫色酶TpmD的酶學(xué)特性研究
從嗜水氣單胞菌DN322中分離純化出能夠?qū)θ交淄轭惾玖辖Y(jié)晶紫、堿性品紅、燦爛綠及孔雀綠進(jìn)行高效脫色的脫色酶,命名為TpmD.在測定TpmD分子量、等電點及對不同三苯基甲烷染料脫色的動力學(xué)參數(shù)、脫色過程對分子氧及NADH/NADPH具有依賴性的基礎(chǔ)上,又進(jìn)一步從黃素FAD/FMN對酶活力的影響、酶抑制劑、酶蛋白N-末端測序及酶溶液的特征吸收光譜等方面對TpmD的酶學(xué)本質(zhì)進(jìn)行了分析.結(jié)果表明,TpmD不含核黃素,其脫色活性也不因加入FAD或FMN而提高.TpmD的N-末端氨基酸序列與多種氧化還原酶具有同源性.甲吡酮及維生素C(Vc)對TpmD的脫色活性具有明顯的抑制作用.TpmD酶蛋白的溶液在408nm處有一特征吸收峰,但在連二亞硫酸鈉的還原條件下通入CO氣體后,該酶卻不具有P450酶在450nm處的特征吸收峰.上述結(jié)果顯示脫色酶TpmD是一種新的氧化酶.
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