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5-氟尿苷生物轉(zhuǎn)化率的影響因素研究
目的:利用產(chǎn)氣腸桿菌EAM-Z1轉(zhuǎn)化合成5-氟尿苷(5-FUR),并對(duì)影響5-FUR轉(zhuǎn)化率的因素進(jìn)行了考察.方法:以磷酸鹽緩沖液(PBS)為溶劑的5-FUR的轉(zhuǎn)化率為對(duì)照,考察反應(yīng)溶劑Na2SO4溶液、中間體穩(wěn)定劑、金屬離子、固定化細(xì)胞、粗酶液等因素對(duì)轉(zhuǎn)化率的影響.結(jié)果:以Na2SO4溶液為溶劑進(jìn)行轉(zhuǎn)化,轉(zhuǎn)化率可提高10%左右;雙中間體穩(wěn)定劑硼砂+硼酸使轉(zhuǎn)化率提高20%左右;Mg2+和Zn2+可提高產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化率,在以PBS為溶劑的轉(zhuǎn)化反應(yīng)中,1 mmol/L Mg2使轉(zhuǎn)化率提高了11.31%,以Na2SO4溶液為溶劑的轉(zhuǎn)化反應(yīng)中,4 mmol/L Zn2+使轉(zhuǎn)化率提高了9.43%;以固定化細(xì)胞進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化,反應(yīng)時(shí)間縮短為1 h,但轉(zhuǎn)化率略有降低;以粗酶液進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化,反應(yīng)時(shí)間為4 h,轉(zhuǎn)化率提高21.29%.結(jié)論:5-FUR的轉(zhuǎn)化率受多種因素的影響,合理的反應(yīng)溶劑如Na2SO4溶液、中間體穩(wěn)定劑、金屬離子、提取酶粗提液等方法均可以較顯著的提高5-FUR的轉(zhuǎn)化率.
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