五指山豬近交系精原干細(xì)胞體外培養(yǎng)研究

對(duì)不同發(fā)育階段五指山小型豬(WZSP)近交系的睪丸組織,采用不同的消化和培養(yǎng)方法進(jìn)行了一系列的探索、研究.實(shí)驗(yàn)顯示:培養(yǎng)SSCs的最佳時(shí)限為仔豬出生后1～20日齡;對(duì)不同日齡仔豬采用不同消化方法,以DMEM為基礎(chǔ)培養(yǎng)液并添加不同成分,34℃,5%CO2培養(yǎng)箱中飽和濕度條件下培養(yǎng),可獲得較好的分離培養(yǎng)結(jié)果;原代SSCs在培養(yǎng)8d后,SSCs開始增殖,桑椹狀的SSCs集落半懸浮隆突生長(zhǎng);SSCs集落AKP染色,細(xì)胞呈陽性反應(yīng);對(duì)SSCs細(xì)胞團(tuán)在STO飼養(yǎng)層上進(jìn)行傳代培養(yǎng),SSCs貼壁良好,培養(yǎng)4d左右大部分SSCs集落和單細(xì)胞消失;采用曲精細(xì)管組織貼壁培養(yǎng)法也同樣獲得桑椹狀SSCs集落,細(xì)胞集落在培養(yǎng)5d后出現(xiàn),半懸浮生長(zhǎng).此外,睪丸組織在4℃PBS液中存放24h后,仍可作為SSCs分離、培養(yǎng)的材料.結(jié)果表明:本研究初步掌握了WZSP近交系精原干細(xì)胞體外分離、培養(yǎng)的技術(shù)方法,為其進(jìn)一步深入研究提供了技術(shù)方法和操作依據(jù).

作 者： 成鋼 馮書堂 CHENG Gang FENG Shu-Tang   作者單位： 成鋼,CHENG Gang(湖南文理學(xué)院,常德,415000)

馮書堂,FENG Shu-Tang(中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧研究所,北京,100094) 

刊 名： 生物工程學(xué)報(bào)  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2006 22(4)  分類號(hào)： Q813.1  關(guān)鍵詞： 五指山豬   SSCs   消化方法   日齡   體外培養(yǎng)  

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