離子注入選育霉酚酸高產(chǎn)菌株及其發(fā)酵條件研究

離子注入技術(shù)是20世紀(jì)80年代興起的一種綜合誘變技術(shù),其應(yīng)用于生物工程已取得了豐碩成果,但在霉酚酸產(chǎn)生菌的誘變育種中的應(yīng)用還未見報(bào)道.短密青霉菌(Penicillium brevicompactum)M-51是從土壤中分離得到的MPA產(chǎn)生菌F-663經(jīng)過紫外線、微波等誘變處理得到的.為獲得霉酚酸的高產(chǎn)工業(yè)菌株,進(jìn)一步對(duì)該菌株進(jìn)行了離子注入誘變處理.用15keV氮離子分5個(gè)劑量進(jìn)行處理,結(jié)果顯示,隨離子注入劑量增加,存活率呈現(xiàn)較明顯的下降-上升-下降的"馬鞍型"變化趨勢.在劑量為140×2.6×1013ions/cm2時(shí),菌株變異率及正變率均最高,分別達(dá)到88.9%和63.4%.用HPLC定量測定發(fā)酵液中霉酚酸的含量,篩選到產(chǎn)霉酚酸能力提高30.1%的突變株M-163.經(jīng)過連續(xù)傳代試驗(yàn),其遺傳性狀穩(wěn)定.對(duì)發(fā)酵條件的優(yōu)化結(jié)果顯示最佳種齡為24h;用正交試驗(yàn)方法對(duì)發(fā)酵培養(yǎng)基中的碳、氮源進(jìn)行優(yōu)化,得到較優(yōu)配方.突變株M-163在最優(yōu)發(fā)酵條件下,霉酚酸搖瓶發(fā)酵單位可達(dá)2819μg/mL.野生菌株F-663的MPA產(chǎn)量為133ug/mL,經(jīng)過5代誘變育種及發(fā)酵條件優(yōu)化,產(chǎn)量提高了20.2倍.

作 者： 劉梅 張鵬 崔曉蘭 任曉 張華 LIU Mei ZHANG Peng CUI Xiao-lan REN Xiao ZHANG Hua   作者單位： 劉梅,LIU Mei(北京化工大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,北京,100029;華北制藥集團(tuán)新藥研究開發(fā)中心國家微生物藥物工程研究中心,石家莊,050015)

張鵬,ZHANG Peng(北京化工大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,北京,100029)

崔曉蘭,任曉,張華,CUI Xiao-lan,REN Xiao,ZHANG Hua(華北制藥集團(tuán)新藥研究開發(fā)中心國家微生物藥物工程研究中心,石家莊,050015) 

刊 名： 微生物學(xué)報(bào)  ISTIC PKU 英文刊名： ACTA MICROBIOLOGICA SINICA  年，卷(期)： 2006 46(5)  分類號(hào)： Q93  關(guān)鍵詞： 離子注入   霉酚酸   短密青霉菌   選育  

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