人白介素-3乳腺表達載體的構(gòu)建

人白介素-3是一種造血系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)劑,在治療造血系統(tǒng)疾病、腫瘤、先天或獲得性免疫功能缺陷等方面發(fā)揮著重要作用.應(yīng)用牛乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)人白介素-3的研究具有重要的臨床應(yīng)用和經(jīng)濟價值.研究選用具有紅色熒光蛋白報告基因(Red2)和新霉素抗性基因(neor)表達框架的pDsRed2-1質(zhì)粒為骨架構(gòu)建人白介素-3乳腺表達載體.通過PCR方法分別擴增牛β-酪蛋白基因5′端上游調(diào)控序列、人IL-3基因以及CMV啟動子序列,將它們按先后順序分別定向克隆于質(zhì)粒pDsRed2-1的多克隆位點內(nèi),使牛β-酪蛋白基因調(diào)控序列位于人IL-3基因的上游,指導人IL-3基因在乳腺組織中特異性表達,而CMV啟動子位于紅熒光蛋白基因的上游,指導紅熒光蛋白基因在所有的組織中非特異性表達.限制性酶切片段分析及部分DNA序列鑒定結(jié)果表明,所構(gòu)建載體結(jié)構(gòu)正確.

作 者： 多曙光 吳應(yīng)積 羅奮華 旭日干 DUO Shu-guang WU Ying-ji LUO Fen-hua BOU Shorgan   作者單位： 內(nèi)蒙古大學哺乳動物生殖生物學及生物技術(shù)教育部重點實驗室,呼和浩特,010021  刊 名： 內(nèi)蒙古大學學報（自然科學版）  ISTIC PKU 英文刊名： ACTA SCIENTIARUM NATURALIUM UNIVERSITATIS NEIMONGOL  年，卷(期)： 2006 37(5)  分類號： Q819  關(guān)鍵詞： 載體構(gòu)建   牛β-酪蛋白基因啟動子   人白介素-3基因  

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