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藻藍(lán)蛋白裂合酶CpeS色氨酸定點誘變及體內(nèi)重組功能研究
為了研究藻藍(lán)蛋白β亞基Cys-84裂合酶CpeS結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系以及色氨酸殘基對于該酶功能的影響,構(gòu)建了藻藍(lán)蛋白β亞基Cys-84裂合酶CpeS的兩個色氨酸突變體,分別為CpeS(W14I) 和CpeS(W75S).通過體內(nèi)重組檢測酶活性的變化,研究色氨酸殘基的突變對裂合酶催化活性的影響.重組結(jié)果顯示:突變體CpeS(W14I)的催化活性幾乎完全喪失,為野生型的8%;突變體CpeS(W75S)的催化活性為野生型的76%.由此推測,第14位色氨酸可能是CpeS酶活性的必需氨基酸,其所處的位置可能是裂合酶CpeS的活性位點.
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